Polyclonal antibody based noncompetitive immunoassay for small analytes developed with short peptide loops isolated from phage libraries

Dublin Core

Título

Polyclonal antibody based noncompetitive immunoassay for small analytes developed with short peptide loops isolated from phage libraries

Tema

INMUNOENSAYO
PEPTIDOS
BIBLIOGRAFIA NACIONAL QUIMICA
2007

Abstract

To date, there are a few technologies for the development of noncompetitive immunoassays for small molecules, the most common of which relies on the use of anti-immunocomplex antibodies. This approach is laborious, case specific, and relies upon monoclonal antibody technology for its implementation. We recently demonstrated that, in the case of monoclonal antibody-based immunoassays, short peptide loops isolated from phage display libraries can be used as substitutes of the anti-immunocomplex antibodies for noncompetitive immunodetection of small molecules. The aim of this work was to demonstrate that such phage ligands can be isolated even when the selector antibodies are polyclonal in nature. Using phenoxybenzoic acid (PBA), a major pyrethroid metabolite, as a model system, we isolated the CFNGKDWLYC peptide after panning a cyclic peptide library on the PBA/anti-PBA immunocomplex. The sensitivity of the noncompetitive enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) setup with this peptide was 5-fold (heterologous) or 400-fold (homologous) higher than that of the competitive assay setup with the same antibody. Phage anti-inmunocomplex assay (PHAIA) was also easily adapted into a rapid and highly sensitive dipstick assay. The method not only provides a positive readout but also constitutes a major shortcut in the development of sensitive polyclonal-based assays, avoiding the need of synthesizing heterologous competing haptens.

Autor

González Techera, Andrés
Kim, H. J.
Gee, S.J.
Last, J.A.
Hammock, B. D.

Fuente

Analytical Chemistry v. 79, no. 23, 2007. -- p. 9191-9196

Editor

American Chemical Society

Fecha

2007

Derechos

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Formato

PDF

Idioma

Ingles

Tipo

Artículo

Identificador

DOI: 10.1021/ac7016713
Fecha de agregación
November 19, 2014
Colección
Bibliografía Nacional Química
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
Citación
González Techera, Andrés, “Polyclonal antibody based noncompetitive immunoassay for small analytes developed with short peptide loops isolated from phage libraries,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed January 19, 2020, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/2026.
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