Estudio químico de la leche materna en el Uruguay]]> Armand Ugon, Nelly]]> Dr. Gonzalez Correa, Otto (Patrocinador de la Tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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ADVERTENCIA - La consulta de este documento queda condicionada a la aceptación de las siguientes condiciones de uso: Este documento es únicamente para usos privados enmarcados en actividades de investigación y docencia. No se autoriza su reproducción con fines de lucro. Esta reserva de derechos afecta tanto los datos del documento como a sus contenidos. En la utilización o cita de partes debe indicarse el nombre de la persona autora.

]]> Aguas del Uruguay : contribución a su estudio]]> Arce, María Isabel de]]> Dr.Peluffo, Antonio (Orientador de Tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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La legislación uruguaya protege el derecho de autor sobre toda creación literaria, científica o artística, tanto en lo que tiene que ver con sus derechos morales, como en lo referente a los derechos patrimoniales con sujeción a lo establecido por el derecho común y las siguientes leyes (LEY 9.739 DE 17 DE DICIEMBRE DE 1937 SOBRE PROPIEDAD LITERARIA Y ARTISTICA CON LAS MODIFICACIONES INTRODUCIDAS POR LA LEY DE DERECHO DE AUTOR Y DERECHOS CONEXOS No. 17.616 DE 10 DE ENERO DE 2003, LEY 17.805 DE 26 DE AGOSTO DE 2004, LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006 LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006)

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]]> Optimización de la reacción de esterificación de acidos grasos por catálisis enzimática]]> Se realiza la optimización del proceso, controlando variables como el pH, la temperatura, el tiempo de reacción, la relación de fases y concentraci6n de enzima. En primera instancia se analizan los "rangos utiles", es decir los valores de las variables dentro de los cuales se procedera a realizar la optimización.
Se realizó luego un diseno experimental factorial en forma de caja, con 3 variables continuas: pH, temperatura y tiemPO de reacci6n. Se analizaron los resultados del diseno y se procedió a modelar matematicamente el comPOrtamiento de la enzima. El modelo fue verificado mediante tests estadisticos. Debido a los resultados del primer diseno, se realizó un segundo, en determinada zona del espacio de valores de las variables, para encontrar el maximo absoluto alcanzable.
Se optimizaron luego las variables relación de fases y de sustratos para mejorar las posibilidades de la reacción. Se encontró un óptimo de rendimiento en MAG del 50%, que resulta alto si se considera la sencillez del metodo de reacción empleado. Los resul tados son mejorables si se modifica el sistema de reacci6n, realizando un control de la cantidad de agua en el sistema, tanto antes de la reacción, como durante la misma eliminando el agua formada mediante eliminación por evaporación.
Se analizaron tambien las limitaciones del metodo de analisis utilizado. Las cantidades de producto fueron cuantificadas por densitometria de barrido en placa fina. Se estudió el error del metodo observandose que conduce a resultados que solo son reproducibles entre un 10 y un 15%, sin duda se han encontrado resul tados mas precisos con otros metodos de analisis.
Se estudió tambien la especificidad de la enzima frente a las especies lipidicas, habiendose encontrado que la reacción de formación de DAG es muy rapida, y la de TAG no ocurre en condiciones de alrededor de 5 horas de reacci6n.
Finalmente se comprob6 que a partir de los sustratos con los que se trabajó, la esterificación de monoenos transcurre mucho mas rapidamente que la de dienos y trienos. Sin embargo queda pendiente un estudio cabal sobre el tema pues deb era trabajarse con sustratos en donde las cantidades de dichos acidos sea comparable a la de los otros acidos.

]]> Amaral Mathon, Gabriel]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Caracterización de Acetobacter Diazotrophicus]]> Alvarez Sanna, Beatriz]]> Dra. Martínez-Drets, Gloria (Orientadora)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Estudios sobre el sistema tiorredoxina de Echinococcus granulosus

]]> En este trabajo se describe el aislamiento, por una estrategia de RT-PCR, del gen que codifica para la TR del cestodo Echinoccocus granulosus (EgTR). Del analisis del gen se deduce que la EgTR es una selenoenzima con los dominios caracteristicos de las TR de mamiferos, destacandose el sitio activo carboxilo terminal portador de una selenocisteina (Sec). La presencia de este sitio activo con Sec puede conferir a la enzima la capacidad de reducir un rango amplio de sustratos. En el analisis filogenetico de TR, la EgTR agrupa con las TR de mamiferos y Caenorhabditis elegans (TR mayores), bien diferentes estas alas TR de procariotas, plantas y levaduras (TR menores). Dentro de las TR mayores, la EgTR agrupa con las TR que contienen Sec de origen citosolico. Este analisis indica que la presencia de una selenocisteina en las TR pudo haber aparecido en el filo platelminto, y mantenido durante la evolucion.
Por otra parte, durante el trabajo de esta tesis se produjeron en forma recombinante la T rx y la tiorredoxina peroxidasa (TPx) de E. granulosus,. La TPx es una peroxido de hidrogeno reductasa cuyo sitio activo es regenerado por el sistema tiorredoxina. Ambas proteinas recombinantes resultaron activas. La actividad de la TPx de proteccion del ADN ante las oxidaciones catalizadas por metales resulto potenciada en presencia de la Trx.
Por ultimo se estudio por inmuno blot la expresion de la TR, Trx y TPx de E. granulosus en un extracto soluble de protoescolex (PE) , utilizando antisueros generados durante este trabajo. Estos u/timos reconocieron bandas unicas en el extracto, cuyos tamafios coincidieron con los esperados para las protein as en base a sus secuencias codificantes. Estos resultados indican que TR, Trx, y TPx se expresan en PE y que los antisueros generados son especificos.
Los resultados de esta tesis se discuten en el contexto del posible papel del sistema tiorredoxina y la TPx, uno de sus blancos. en la defensa de E. granulosus frente al estres oxidativo.

]]> Agorio Norstrom, Astrid]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Eflujo activo de antibióticos mediada por el sistema MtrC-MtrD-MtrE en Neisseria gonorrhoeae]]> Acevedo Villamil, Ana

]]> Dra. Borthagaray, Graciela (Orientadora)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Caracterización in vivo, in vitro e in silico de una serie de agonistas nicotínicos derivados de citisina]]> Abin Carriquiry, Juan Andrés]]> Dra.Paulino Zunino, Margot (Directora de Tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Análisis comparativo de los venenos ofídicos de importancia clínica y estudio bioquímico del accidente ofídico en Uruguay

]]> Morais, Victor

]]> 2012]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Obtención y caracterización de tamices moleculares de carbón]]> Amaya, Alejandro]]> Prof. Dr.Tancredi, Nestor (Director de Tesis)]]> Ing. Quím. Medina, Nilda (Co-directora)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Préparation de nouveaux catalyseurs a base d'oxydes mixtes de lanthane et zirconium et application au réformage d'éthanol pour la production d'hydrogène]]> Bespalko, Nicolás]]> Dr. Bussi, Juan (Director de Tesis)]]> Dr. Roger,Anne-Cecile (Directora de Tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Caracterización bioquímica de la cistationina B-sintasa :propiedades redox del hemo y reactividad de su producto, el sulfuro de hidrógeno

]]> Carballal Zeballos, Juan Sebastián]]> Dra. Beatriz Alvarez (Director de tesis)
]]> Dr. Rafael Radi (Director de tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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La legislación uruguaya protege el derecho de autor sobre toda creación literaria, científica o artística, tanto en lo que tiene que ver con sus derechos morales, como en lo referente a los derechos patrimoniales con sujeción a lo establecido por el derecho común y las siguientes leyes (LEY 9.739 DE 17 DE DICIEMBRE DE 1937 SOBRE PROPIEDAD LITERARIA Y ARTISTICA CON LAS MODIFICACIONES INTRODUCIDAS POR LA LEY DE DERECHO DE AUTOR Y DERECHOS CONEXOS No. 17.616 DE 10 DE ENERO DE 2003, LEY 17.805 DE 26 DE AGOSTO DE 2004, LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006 LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006) ADVERTENCIA - La consulta de este documento queda condicionada a la aceptación de las siguientes condiciones de uso: Este documento es únicamente para usos privados enmarcados en actividades de investigación y docencia. No se autoriza su reproducción con fines de lucro. Esta reserva de derechos afecta tanto los datos del documento como a sus contenidos. En la utilización o cita de partes debe indicarse el nombre de la persona autora.

]]> Preparación de sintones para la obtención de epoxienonas dimétricas naturales y análogos : introducción de sus cadenas laterales

]]> Heguaburu, Viviana

]]> Dr. Pandolfi, Enrique ( Director de tesis)]]> Dra.Schapiro, Valeria ( Directora de tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Análisis de las concepciones de ciencia que subyacen a los procesos educativos en el área científico-tecnológica

]]> Loureiro Barrella, Silvia

]]> Dra. Míguez, Marína ( Directora de Tesis)]]> Dra. Esperón, Patricia ( Directora de Tesis)
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]]> Estudio de los aspectos microbiológicos de los problemas de sedimentación de sistemas de tratamiento biológico de efluentes de remoción de nitrógeno

]]> Draper, Patricia

]]> Dra. Etchebehere, Claudia (Directora de Tesis)]]> Dra. Franco Fraguas, Laura (Directora de Tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Desarrollo y evaluación química, biológica y dosimétrica del anticuerpo anti-CD20 (Rituaximab) marcado con 177Lu como radiofármaco para tratamiento del Linfoma no Hodgkin

]]> Audicio, Paola

]]> Dra. Balter, Henia (Directora de tesis)]]> Dra. Oliver, Patricia (Directora de Tesis)]]> I. Q. Robles, Ana María (Directora de Tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Aproximación quimioenzimática a la síntesis total de epoxienonas quirales naturales

]]> Labora, Maitia

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]]> Transesterificación en alcoholes supercríticos como alternativa para la producción de biodiesel

]]> El biodiesel se obtiene tradicionalmente mediante la transesterificación de un aceite vegetal con un alcohol, generalmente metanol, en presencia de un catalizador químico básico. Este método, si bien resulta conveniente por su alta eficiencia y bajo costo, presenta varios inconvenientes, como ser la necesidad de pretratamiento de los materiales grasos muy ácidos, la imposibilidad de utilizar etanol rectificado (por el contenido de agua presente), la baja calidad de la glicerina producida y la producción de elevados volúmenes de efluentes. Existen numerosos antecedentes que indican que es posible alcanzar elevadas eficiencias en la síntesis de biodiesel mediante la exposición de aceites a metanol supercrítico, sin necesidad de utilizar catalizadores y aún en presencia a elevadas concentraciones de agua en el medio de reacción. La posibilidad de disponer de un método eficiente de transesterificación en presencia de agua resulta interesante a los efectos de la posible utilización de alcohol rectificado, actualmente producido en Uruguay a partir de azúcar de caña. En esta tesis se estudió la eficiencia de la elaboración de biodiesel en un reactor de flujo continuo a partir de diferentes materiales grasos de origen nacional y mediante la utilización de etanol en condiciones supercríticas, determinándose el efecto sobre la eficiencia del proceso de los diferentes parámetros operativos y, en particular, del nivel de agua adicionado al alcohol. Los resultados obtenidos indican que la elaboración de biodiesel en alcoholes supercríticos, tanto metanol como etanol, puede ser realizada en forma eficiente si se elige convenientemente los parámetros operativos del proceso. Se obtuvo contenidos de éster máximos en el entorno del 80%, operando un reactor continuo de 42 mL a una temperatura de 350ºC, una presión de 20 MPa y una relación molar alcohol/aceite de 40:1, para flujos y contenidos de agua variables según el aceite utilizado. En esas condiciones, el proceso de conversión en biodiesel de los aceites vegetales refinados de soja, girasol y girasol de alto oleico y de ricino, en biodiesel en etanol supercrítico se pudo alcanzar en forma relativamente eficiente. Sin embargo, el análisis de los productos de reacción demostró que la exposición del material lipídico a las condiciones extremas de temperatura y presión requeridas para que ocurra la transesterificación, produjo la aparición de isómeros trans de todos los ácidos grasos insaturados y la reducción del porcentaje de los más insaturados. En general, la adición de agua al alcohol destinado al proceso afectó favorablemente al rendimiento de la transesterificación en alcoholes supercríticos, lo que constituyó una diferencia muy significativa en relación al proceso conducido mediante la catálisis química convencional (el cual requiere del suministro de reactivos anhidros). Este efecto favorable se atribuyó a la combinación de dos fenómenos vinculados con la presencia de agua en el medio de reacción: el aumento de la velocidad de reacción y la disminución de la degradación de los ácidos grasos insaturados. Los trabajos realizados permitieron demostrar que el método supercrítico de transesterificación sin catalizador constituye una alternativa válida a la catálisis química convencional para la síntesis de biodiesel, debiendo considerarse las características de la materia prima a utilizar para la selección de los parámetros operativos óptimos. Dado que la mayoría de las normativas sobre biodiesel exigen que esté constituido por no menos de un 96.5% de ésteres alquílicos, los trabajos en esta área continuarán enfocados a maximizar el contenido de éster, lo que únicamente se podrá lograr a costa de disminuir el grado de descomposición.

]]> Vieitez Osorio, Ignacio

]]> Dr. Jachmanián Alpuy, Iván ( Director de tesis)]]> Dra. Grompone, María Antonia (Directora de tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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La legislación uruguaya protege el derecho de autor sobre toda creación literaria, científica o artística, tanto en lo que tiene que ver con sus derechos morales, como en lo referente a los derechos patrimoniales con sujeción a lo establecido por el derecho común y las siguientes leyes (LEY 9.739 DE 17 DE DICIEMBRE DE 1937 SOBRE PROPIEDAD LITERARIA Y ARTISTICA CON LAS MODIFICACIONES INTRODUCIDAS POR LA LEY DE DERECHO DE AUTOR Y DERECHOS CONEXOS No. 17.616 DE 10 DE ENERO DE 2003, LEY 17.805 DE 26 DE AGOSTO DE 2004, LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006 LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006) ADVERTENCIA - La consulta de este documento queda condicionada a la aceptación de las siguientes condiciones de uso: Este documento es únicamente para usos privados enmarcados en actividades de investigación y docencia. No se autoriza su reproducción con fines de lucro. Esta reserva de derechos afecta tanto los datos del documento como a sus contenidos. En la utilización o cita de partes debe indicarse el nombre de la persona autora.

]]> N-Óxido de heterociclos aromáticos con actividad sobre Trypanosoma Cruzi:Aproximación al tipo de muerte celular y mecanísmo de acción

]]> La enfermedad de Chagas o Tripanosomiasis Americana es una zoonosis cuyo agente etiológico es un protozoario flagelado, el Trypanosoma cruzi (T. cruzi) (orden Kinetoplastida, familia Trypanosomatidae). A más de un siglo de su descubrimiento, esta patología compromete la salud de un gran número de habitantes en Latinoamérica, no existiendo hasta el momento fármacos completamente efectivos para su tratamiento. De la quimioteca de agentes anti-T. cruzi de nuestro laboratorio se seleccionaron compuestos pertenecientes a tres diferentes familias de N-óxido de heterociclo-aromático (tres furoxanos, Fx1, Fx2 y Fx3, dos benzofuroxanos, Bfx1 y Bfx2, y dos di-N-óxido de quinoxalinas, Qdo1, Qdo2), además de un nitrofurano (Nf1). Estos productos, son el resultado de optimizaciones químicas dirigidas por la actividad observada. Se escoge además como fármaco de referencia a Nifurtimox, como forma de comparar el comportamiento biológico de T. cruzi frente a los compuestos objeto de este estudio. Trabajando sobre epimastigotes de T. cruzi se realizaron estudios que demostraron o aproximaron al tipo de muerte celular que el parásito expuesto a cada uno de los compuestos estudiados. Primariamente fueron realizados estudios de microscopia óptica-tinción con azul de tripan o microscopía fluorescente-tinción con ioduro de propidio. De estos estudios, se determinó que todos los compuestos a dosis altas, excepto el furoxano Fx1 que por su baja actividad y baja solubilidad no permite extraer conclusiones, promueven una pérdida de la integridad de membrana de T. cruzi que indicarían una muerte por necrosis. Los estudios de muerte celular a bajas dosis, por ensayo de TUNEL, no evidencian muerte de T. cruzi por apoptosis con ninguno de los compuestos estudiados. Particularmente, el nitrofurano Nf1, el furoxano Fx3 y el benzofuroxano Bfx1 inducen en el parásito, previo a su muerte y manteniendo adecuada movilidad, la formación de estructuras citoplasmáticas vacuolares que podrían indicar muerte por autofagia. Para concluir respecto a este punto se realizaron estudios morfológicos por microscopia electrónica de transmisión y experimentos con el inhibidor de autofagia 3-Metiladenina. Estos estudios no son concluyentes, sin embargo las microfotografías del tratamiento con estos 3 compuestos identifican estructuras tipo-autofagosoma. Se implementa el uso de 1H-RMN para determinar el tipo de muerte celular en epimastigotes de T. cruzi de la cepa Y cuantificando las señales correspondientes a metilenos y metilos de los lípidos móviles de las membranas, estudiando además las modificaciones de fosfatidilcolina. Esta es la primera vez que se utiliza dicha técnica para estudios con parásitos y especialmente con T. cruzi. Por otro lado, se estudió el cambio en el perfil metabólico de epimastigotes de T. cruzi tratados con los compuestos de este estudio. Para ello se utilizó la medida, por 1H-RMN, de los metabolitos excretados por el parásito. De acuerdo a estos resultados se decidió identificar un grupo de enzimas que podrían estar involucradas en el mecanismo de acción de los agentes. Por ello, se analizó la inhibición de deshidrogenasas mitocondriales, por ensayo con MTT a tiempos cortos. Estos estudios permiten plantear un posible mecanismo de acción común para los di-N-óxido de quinoxalinas Qdo1 y Qdo2 por inhibición de la fumarato reductasa o la malato deshidrogenasa mitocondriales o ambas.

]]> Benítez, Diego

]]> Dra. Gonzalez, Mercedes ( Directora de tesis)]]> Dr. Cerecetto,Hugo (Director de tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Profundización en el entendimiento del rol de los transportadores de membrana en la terapéutica farmacológica de la epilepsia

]]> Maldonado, Cecilia

]]> Dra. Vazquez, Marta (Directora de Tesis)]]> Dr. Fagiolino, Pietro (Director de Tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Aspectos químicos y biológicos de la comunicación química en Cryptoblabes gnidiella (Lepidoptera: Pyralidae)

]]> Sellanes, María Carolina

]]> González, Andrés (Director de tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Producción de lectinas de hongos basidiomicetes y estudio de sus interacciones frente a glicocompuestos

]]> Alborés Malán, Silvana

]]> Franco Fraguas,Laura (Directora de Tesis)]]> Cerdeiras,Maria Pía (Directora de Tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Investigación y desarrollo de nuevos fármacos anti-T. cruzi : inhibidores de cruzipaína derivados del sistema benzofuroxano y 1,3-dióxido de benzimidazol]]>

La enzima cruzipaína, principal cisteín proteasa de Trypanosoma cruzi, está involucrada en diversas etapas relacionadas con el ciclo de vida del parásito lo cual la convierte en un interesante blanco terapéutico para el desarrollo de nuevos fármacos antichagásicos. En el presente trabajo de tesis doctoral se realizó el diseño, síntesis, evaluación biológica frente al parásito, estudios de inhibición enzimática y estudios de relación estructura-actividad inhibitoria de nuevos compuestos híbridos derivados del sistema benzofuroxano y 1,3-dióxido de benzimidazol conteniendo agrupamientos semicarbazona, tiosemicarbazona y amidinohidrazona (Serie I) o agrupamientos arilguanidina (Serie II) como potenciales inhibidores de cruzipaína. Los nuevos compuestos desarrollados se prepararon empleando procedimientos sintéticos eficientes. La caracterización estructural se realizó por técnicas espectroscópicas habituales. Los nuevos compuestos se evaluaron sobre la forma epimastigota de T. cruzi y se estudió su toxicidad frente a glóbulos rojos humanos y macrófagos murinos. Los derivados de la Serie II mostraron excelentes actividades frente al parásito, identificándose derivados, pertenecientes a ambas series, con índices de selectividad mayores que 50, siendo este valor para las referencias, anfotericina B y nifurtimox, de 10 y mayor que 13, respectivamente. Los nuevos compuestos presentaron una actividad variable frente a cruzipaína, no encontrándose relación entre ésta y la actividad anti-T. cruzi. En general, los derivados de la Serie I fueron mejores inhibidores de cruzipaina que los de la Serie II. A fin de racionalizar la actividad frente a cruzipaína se realizaron estudios de interacción inhibidorenzima empleando técnicas de docking y de resonancia magnética nuclear, experimentos de variación del tiempo de relajación longitudinal, experimentos DOSY y experimentos de diferencia en la transferencia de saturación, que permitieron analizar en forma detallada las interacciones de los distintos ligandos con residuos clave localizados en el sitio activo de la enzima.

]]> Merlino Mellognio, Alicia Beatriz]]> Dr. Cerecetto, Hugo ( Director de Tesis)]]> Dra. González, Mercedes (Directora de Tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Application of sensory methodologies to the development of functional foods]]>

El objetivo general de la tesis fue la aplicación y el estudio de metodologías sensoriales al desarrollo de un alimento funcional. La tesis se dividió en tres grandes partes: el estudio de la percepción de alimentos funcionales por parte de consumidores uruguayos, el estudio de extractos antioxidantes de plantas nativas uruguayas como ingredientes funcionales, y el desarrollo de un alimento funcional enriquecido con antioxidantes. En la primer parte de la tesis se estudió la percepción de consumidores uruguayos de alimentos funcionales mediante la aplicación de distintas metodologías (encuestas, laddering, asociación libre y análisis conjunto). Los resultados de los estudios realizados indicaron que los consumidores uruguayos tienen una actitud positiva hacia los alimentos funcionales. En particular, los consumidores estuvieron interesados en postres lácteos y yogures enriquecidos con antioxidantes. La f en que se declara el agregado del ingrediente funcional y la utilización de declaraciones sobre efectos en la salud tuvieron un elevado impacto en el interés de los consumidores en estos productos. Luego, se estudió el perfil sensorial, el contenido de polifenoles y la capacidad de secuestrar radicales libres de tres extractos (acuoso, etanólico y acetónico) de tres plantas nativas uruguayas ( , and ). Debido a la elevada intensidad de amargor, astringencia y sabor característico de los extractos, se estudiaron alternativas para reducir estos sabores: sacarosa, sucralosa, polidextrosa leche y saborizantes. Los resultados indicaron que productos lácteos dulces sabor chocolate podrían ser alimentos base interesantes para el desarrollo de alimentos funcionales enriquecidos con extractos antioxidantes ricos en polifenoles obtenidos de . Utilizando diferentes metodologías, como mapeos proyectivos, preguntas abiertas, preguntas marque todo lo que corresponda y mapeos de preferencia externos se seleccionó una formu ión de Achyrocline s atureoide s Baccharis trime ra Mikania guaco Achyrocline s atureoide s un postre lácteo de chocolate con una elevada aceptación por parte de los consumidores. Utilizando esta formulación como producto base, se desarrollaron postres lácteos de chocolate enriquecidos con un extracto antioxidante acuoso de . Considerando los puntajes de aceptablidad de los consumidores se determinó que la máxima concentración de este extracto que podría ser agregada a los postres correspondía a una concentración de polifenoles de 0.4 g/L. Este producto podría alcanzar una porción interesante del mercado debido a que una alta proporción de los consumidores lo eligió frente a un postre lácteo de chocolate común. Por lo tanto, el desarrollo de este tipo de alimento funcional podría ser una alternativa para que las empresas lácteas uruguayas lancen al Mercado productos diferenciales con un mayor valor agregado. Todas las metodologías evaluadas probaron ser extremadamente útiles durante el desarrollo de un alimento funcional. Las mismas podrían ser utilizadas en el desarrollo de alimentos para lograr incorporar en mayor medida las necesidades de los consumidores, lo cual podría aumentar el éxito del pro e desarrollo de nuevos productos.

]]> Ares Devincenzi, Gastón

]]> Gámbaro, Adriana y Deliza, Rosires (Directores de tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Purificación y caracterización de B-glucosidasas de cepas nativas de levadura. Diseño de un biocatalizador inmovilizados para la mejora de la calidad de vinos

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La tipicidad aromática de los vinos está determinada por la variedad de vid utilizada así como por los procesos químicos y biológicos que se desarrollan durante el proceso de vinificación y añejamiento. En especial, el desarrollo de los aromas depende en gran parte de la existencia durante elaboración del vino, de enzimas capaces de actuar eficientemente sobre los sustratos glicosídicos existentes, generando compuestos volátiles. Debido a que muy pocas de las cepas de levaduras encontradas en los procesos de vinificación producen enzimas estables y activas en esas condiciones, existe un gran interés en la caracterización de nuevos biocatalizadores así como de un mejor conocimiento de las variables que determinan el proceso de desarrollo de aromas en vinos. En el presente trabajo se abordaron aspectos relacionados con el aislamiento, caracterización e inmovilización de -glucosidasas de cepas de levaduras autóctonas aisladas de mostos y uvas provenientes de viñedos uruguayos, así como el estudio de su comportamiento en la liberación de aromas en un vino joven. Se estudiaron en particular las -glucosidasas provenientes de tres cepas no- : , y Mediante diversas estrategias se desarrollaron biocatalizadores inmovilizados de glucosidasas y se estudió su estabilización mediante estrategias tales como la modificación del nano-ambiente que rodea la enzima, con la finalidad de obtener biocatalizadores activos y estables en condiciones de pH ácido y concentración de etanol similar al presente en vinos. Particularmente, se destaca el desarrollo del biocatalizador inmovilizado de - glucosidasa de que presenta propiedades muy convenientes y buena funcionalidad en vino, con una buena estabilidad de al vida media muy competitiva en condiciones enológicas, permite su aplicación en vinos. Su utilización hace posible un mejor control del proceso de hidrólisis lo cual es muy importante para el tratamiento de los vinos jóvenes, ya que permite una liberación rápida y controlada de terpenos y otros compuestos, facilitando la b-Saccharomyces Metschnikowia pulcherrima Issatschenkia terricola Hanseniaspora uvarum I. terricola venta rápida del producto, conservando una fracción de aromas ligados como reserva aromática potencial, a ser liberada en el tiempo. Se caracterizó la actividad enzimática de este derivado sobre los precursores aromáticos presentes en un vino blanco Moscatel, en comparación con la correspondiente actividad de un biocatalizador inmovilizado obtenido a partir de un preparado comercial de glicosidasas de . Se identificaron y cuantificaron los compuestos liberados y se evaluó el impacto sensorial de ambos tratamientos enzimáticos en las propiedades aromáticas del mismo. Los resultados obtenidos en este estudio demuestran que hay un importante incremento de los terpenos y norisoprenoides en los vinos tratados enzimáticamente con respecto al vino control. Particularmente la concentración de norisoprenoides fue mayor en el vino tratado con la -glucosidasa inmovilizada de Se destaca la diferencia en especificidad que presenta dicha -glucosidasa en relación a las glicosidasas comerciales de estudiadas, que determinan propiedades sensoriales diferenciables en los vinos tratados con estas enzimas. Esta especificidad podría ser la responsable de aportar cierta complejidad aromática en los vinos blancos jóvenes en los cuales no es habitual encontrar los compuestos mencionados anteriormente. Se pretende con este trabajo contribuir al mejor conocimiento del potencial existente en enzimas de la flora autóctona, lo que a su vez permitirá evaluar el rol de la especificidad de estas enzimas en el desarrollo del perfil aromático de los vinos y generar las bases para estudiar la posible utilización enológica de las - glucosidasas.

]]> Gonzalez Pombo, Paula

]]> Dr. Brena, Beatriz (Director de Tesis)

]]> Dr. Batista, Francisco (Director de Tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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]]> Interacción de iones metálicos con inositol fosfatos

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Las biomoléculas obtenidas por fosforilación del isómero myo del inositol constituyen un grupo de más de 25 especies presentes en todas las células eucariotas: los myo‐inositol fosfatos (InsP). Presentan entre sí una estrecha relación metabólica, encontrándose en concentraciones variables en los distintos compartimentos biológicos. Si bien las funciones biológicas de los InsP están lejos de ser elucidadas, las nuevas ideas sobre el tema destacan la importancia de la interacción de estas moléculas con los iones metálicos. Es así que el estudio de la especiación y estructura química de este tipo de sistemas brindará información de gran valor en la gestión racional de los experimentos in vitro con este tipo de biomoléculas, así como en la dilucidación de su función biológica, y en la generación de estrategias de síntesis de agonistas y antagonistas con valor terapéutico. En este marco, este trabajo ha estudiado el patrón de reactividad química frente a cationes metálicos de los tres inositol fosfatos más relevantes en medios biológicos: InsP6, Ins(1,3,4,5,6)P5 e Ins(1,2,3)P3. A partir de estudios por potenciometría de alta resolución se lograron determinar las constantes de equilibrio de protonación y complejación en solución para los sistemas conteniendo cada uno de los tres inositol fosfatos mencionados, en ausencia y presencia de cationes metálicos mono o multivalentes. Los resultados indican la existencia, además de las formas libres de ligando y metal, de dos tipos de especies metálicas claramente diferenciadas: complejos 1:1 metal:InsP y complejos polinucleares. La predominancia relativa de cada tipo de compuesto resultó dependiente de algunas características del sistema, como la relación metal:ligando, la naturaleza del metal e inositol fosfato, y el pH. Asimismo, para algunos sistemas conteniendo InsP6 e Ins(1,3,4,5,6)P5, se caracterizaron las fases sólidas obtenidas en condiciones de exceso de ion metálico y se determinó su solubilidad. Esto permitió incluir de forma explícita los equilibrios de precipitación respectivos y describir, de forma completa, el comportamiento químico de estos InsP frente a los iones más relevantes desde el punto de vista biológico. 12 Resumen Tomando en consideración el vacío estructural existente en este campo, este trabajo se ha centrado en las características estructurales más importantes de algunas de las especies en solución y al estado sólido. Las técnicas aplicadas incluyeron RMN de 31P en solución, voltamperometría cíclica, cálculos computacionales, espectroscopía UV‐visible, infrarroja y Raman, y RMN de 13C al estado sólido. El tratamiento de los datos recabados permitió analizar la secuencia de protonación de los ligandos y su influencia en los procesos de complejación. Por otra parte, un análisis computacional de las preferencias conformacionales de los distintos InsP reveló que mientras que en solución puede operar un cambio conformacional gatillado por el pH y la relación metal:ligando, al estado sólido el InsP6 parece existir en una mezcla de estados conformacionales o en una conformación distorsionada intermedia. Los resultados obtenidos fueron finalmente aplicados al modelado del comportamiento químico de los tres inositol fosfatos en medios que simulan el ambiente intra o extracelular, así como en los procesos de digestión.

]]> Veiga, Nicolás]]> Kremer, Carlos (Director de Tesis)]]> Dra. Torres, Julia (Directora de Tesis)]]> Información sobre Derechos de Autor

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