Estudios sobre el sistema tiorredoxina de Echinococcus granulosus

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Título

Estudios sobre el sistema tiorredoxina de Echinococcus granulosus

Tema

ECHINOCOCCUS GRANULOSUS
PARASITOLOGIA
TESIS
TESIS DE MAESTRIA
URUGUAY

Abstract

EI sistema tiorredoxina (tiorredoxina: Trx y tiorredoxina reductasa: TR), mantiene la homeostasis redox de la celula acoplando el poder reductor del NADPH al intercambio reversible tiol-disulfuro. Este sistema puede reducir enzimas del tipo sustrato reductasas, que forman puentes disulfuro como parte de su cicio cata/itico, ademas de reducir puentes disulfuro formados espontaneamente. En organism os parasitos esta cascada podria operar, adem as, como defensa frente al estres oxidativo impuesto por las celulas del sistema inmune del hospedador. Hasta ahora no ha sido descrito el sistema tiorredoxina en parasitos helmintos.
En este trabajo se describe el aislamiento, por una estrategia de RT-PCR, del gen que codifica para la TR del cestodo Echinoccocus granulosus (EgTR). Del analisis del gen se deduce que la EgTR es una selenoenzima con los dominios caracteristicos de las TR de mamiferos, destacandose el sitio activo carboxilo terminal portador de una selenocisteina (Sec). La presencia de este sitio activo con Sec puede conferir a la enzima la capacidad de reducir un rango amplio de sustratos. En el analisis filogenetico de TR, la EgTR agrupa con las TR de mamiferos y Caenorhabditis elegans (TR mayores), bien diferentes estas alas TR de procariotas, plantas y levaduras (TR menores). Dentro de las TR mayores, la EgTR agrupa con las TR que contienen Sec de origen citosolico. Este analisis indica que la presencia de una selenocisteina en las TR pudo haber aparecido en el filo platelminto, y mantenido durante la evolucion.
Por otra parte, durante el trabajo de esta tesis se produjeron en forma recombinante la T rx y la tiorredoxina peroxidasa (TPx) de E. granulosus,. La TPx es una peroxido de hidrogeno reductasa cuyo sitio activo es regenerado por el sistema tiorredoxina. Ambas proteinas recombinantes resultaron activas. La actividad de la TPx de proteccion del ADN ante las oxidaciones catalizadas por metales resulto potenciada en presencia de la Trx.
Por ultimo se estudio por inmuno blot la expresion de la TR, Trx y TPx de E. granulosus en un extracto soluble de protoescolex (PE) , utilizando antisueros generados durante este trabajo. Estos u/timos reconocieron bandas unicas en el extracto, cuyos tamafios coincidieron con los esperados para las protein as en base a sus secuencias codificantes. Estos resultados indican que TR, Trx, y TPx se expresan en PE y que los antisueros generados son especificos.
Los resultados de esta tesis se discuten en el contexto del posible papel del sistema tiorredoxina y la TPx, uno de sus blancos. en la defensa de E. granulosus frente al estres oxidativo.

Autor

Agorio Norstrom, Astrid

Editor

Montevideo : UdelaR-Facultad de Química

Fecha

2000

Derechos

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Formato

Papel
Pdf

Extent

78 p.

Idioma

Español

Tipo

Tesis

Identificador

TM 576.8 AGO
Fecha de agregación
September 19, 2012
Colección
Tesis de doctorado, maestría, trabajos de diploma y monografías técnicas
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
,
Citación
Agorio Norstrom, Astrid, “Estudios sobre el sistema tiorredoxina de Echinococcus granulosus,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed December 7, 2019, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/133.
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