Optimización de la reacción de esterificación de acidos grasos por catálisis enzimática
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Abstract
Se realiza la optimización del proceso, controlando variables como el pH, la temperatura, el tiempo de reacción, la relación de fases y concentraci6n de enzima. En primera instancia se analizan los "rangos utiles", es decir los valores de las variables dentro de los cuales se procedera a realizar la optimización.
Se realizó luego un diseno experimental factorial en forma de caja, con 3 variables continuas: pH, temperatura y tiemPO de reacci6n. Se analizaron los resultados del diseno y se procedió a modelar matematicamente el comPOrtamiento de la enzima. El modelo fue verificado mediante tests estadisticos. Debido a los resultados del primer diseno, se realizó un segundo, en determinada zona del espacio de valores de las variables, para encontrar el maximo absoluto alcanzable.
Se optimizaron luego las variables relación de fases y de sustratos para mejorar las posibilidades de la reacción. Se encontró un óptimo de rendimiento en MAG del 50%, que resulta alto si se considera la sencillez del metodo de reacción empleado. Los resul tados son mejorables si se modifica el sistema de reacci6n, realizando un control de la cantidad de agua en el sistema, tanto antes de la reacción, como durante la misma eliminando el agua formada mediante eliminación por evaporación.
Se analizaron tambien las limitaciones del metodo de analisis utilizado. Las cantidades de producto fueron cuantificadas por densitometria de barrido en placa fina. Se estudió el error del metodo observandose que conduce a resultados que solo son reproducibles entre un 10 y un 15%, sin duda se han encontrado resul tados mas precisos con otros metodos de analisis.
Se estudió tambien la especificidad de la enzima frente a las especies lipidicas, habiendose encontrado que la reacción de formación de DAG es muy rapida, y la de TAG no ocurre en condiciones de alrededor de 5 horas de reacci6n.
Finalmente se comprob6 que a partir de los sustratos con los que se trabajó, la esterificación de monoenos transcurre mucho mas rapidamente que la de dienos y trienos. Sin embargo queda pendiente un estudio cabal sobre el tema pues deb era trabajarse con sustratos en donde las cantidades de dichos acidos sea comparable a la de los otros acidos.
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