Magnetic bead-based phage anti-immunocomplex assay (PHAIA) for the detection of the urinary biomarker 3-phenoxybenzoic acid to asses human exposure to pyrethroid insecticides

Dublin Core

Título

Magnetic bead-based phage anti-immunocomplex assay (PHAIA) for the detection of the urinary biomarker 3-phenoxybenzoic acid to asses human exposure to pyrethroid insecticides

Tema

INSECTICIDAS
PIRETROIDES
INMUNOENSAYO
BIBLIOGRAFIA NACIONAL QUÍMICA
2009

Abstract

Noncompetitive immunoassays are advantageous over competitive assays for the detection of small molecular weight compounds. We recently demonstrated that phage peptide libraries can be an excellent source of immunoreagents that facilitate the development of sandwich-type noncompetitive immunoassays for the detection of small analytes, avoiding the technical challenges of producing anti-immunocomplex antibody. In this work we explore a new format that may help to optimize the performance of the phage anti-immunocomplex assay (PHAIA) technology. As a model system we used a polyclonal antibody to 3-phenoxybenzoic acid (3-PBA) and an anti-immunocomplex phage clone bearing the cyclic peptide CFNGKDWLYC. The assay setup with the biotinylated antibody immobilized onto streptavidin-coated magnetic beads significantly reduced the amount of coating antibody giving identical sensitivity (50% saturation of the signal (SC50) = 0.2–0.4 ng/ml) to the best result obtained with direct coating of the antibody on ELISA plates. The bead-based assay tolerated up to 10 and 5% of methanol and urine matrix, respectively. This assay system accurately determined the level of spiked 3-PBA in different urine samples prepared by direct dilution or clean-up with solid-phase extraction after acidic hydrolysis with overall recovery of 80–120%. 

Autor

Kim, Hee-Jo
Ahn, Ki Chang
González Techera, Andrés
Gee, Shirley J.
Hammock, Bruce D.

Fuente

Analytical Biochemistry v.386, no. 1, 2009. -- p.45-52

Editor

Elsevier

Fecha

2009

Derechos

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Formato

PDF

Idioma

Ingles

Tipo

Artículo

Identificador

DOI:10.1016/j.ab.2008.12.003
Fecha de agregación
May 8, 2014
Colección
Bibliografía Nacional Química
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
, ,
Citación
Kim, Hee-Jo, “Magnetic bead-based phage anti-immunocomplex assay (PHAIA) for the detection of the urinary biomarker 3-phenoxybenzoic acid to asses human exposure to pyrethroid insecticides,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed July 21, 2019, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/1421.
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