Captación de hierro a partir de compuestos hemínicos por la cepa sinorhizobium meliloti 242

Dublin Core

Título

Captación de hierro a partir de compuestos hemínicos por la cepa sinorhizobium meliloti 242

Tema

SINORHIZOBIUM MELILOTI
HIERRO
COMPUESTOS HEMINICOS
RECEPTOR DE HEMINA
TESIS
TESIS DE MAESTRIA
URUGUAY

Abstract

Estudios previos realizados en el Laboratorio de Ecologfa Microbiana-IIBCE demostraron que diferentes bacterias no patogenas de ani males, entre ellas los rizobios, eran capaces de utilizar compuestos hemfnicos (hemina, hemoglobina y leghemoglobina) como fuentes de hierro.
EI objetivo general del presente trabajo de tesis fue el de caracterizar los mecanismos de adquisicion de hierro mediados por compuestos hemfnicos presentes en Sinorhizobium meliloti 242.
Los objetivos particulares fueron: a) estudiar la funcion de la L-metionina en la adquisicion de hierro a partir de compuestos hemfnicos y b) detectar y purificar las posibles protefnas de membrana externa con capacidad para unirse a hemina, hemoglobina y leghemoglobina.
A partir de ensayos de crecimiento bacteriano en medio Ifquido y bioensayos, se determino que es necesario suplementar al medio mfnimo de cultivo, MV, con L-metionina 300I-lM para que la cepa Sm 242 sea capaz de crecer en medios limitados en hierro con el agregado de diferentes fuentes de este metal (compuestos hemfnicos 0 sideroforos). Cuando se utilizo glutamato en lugar de amonio como fuente de nitrogeno y se agrego L-metionina al medio de cultivo, se obtuvo una mayor produccion de sideroforos y mayores rendimientos celulares. A partir de la informacion disponible, una posible interpretacion de los resultados obtenidos es que en condiciones de baja disponibilidad de hierro, la vfa de asimilacion del azufre a partir del sulfato, este afectada probablemente a nivel de la sulfito reductasa. La L-metionina en estas condiciones serfa una mejor fuente de azufre para la cepa Sm 242.
Se purifico leghemoglobina a partir de nodulos de soja y se obtuvieron anticuerpos de conejo anti-Ieghemoglobina. Estos anticuerpos se caracterizaron por Western blot comprobondose que no presentan reactividad cruzada con otros compuestos hemfnicos ni con las demos protefnas presentes en el macerado nodular. A su vez, por ELISA, se determino la dilucion de trabajo de los anticuerpos, los cuales seron empleados en experimentos futuros.
Por ultimo, mediante anolisis por SDS-PAGE de fracciones enriquecidas en protefnas de membrana externa, se detecto la presencia de 3 protefnas reguladas por hierro de 80, 82 y 90 kDa. De las 3 protefnas identificadas, la de 90 kDa presento la capacidad de unirse a hemina inmovilizada en agarosa. Anolisis por espectrometrfa de masas (EM-MALDI-TOF) determinaron que la protefna de 90 kDa es homologa 0 aun identica a una posible protefna involucrada en el transporte de hierro (Smc02726) deducida a partir del genoma secuenciado de Sm 1021. Anolisis bioinformoticos mostraron que la secuencia aminoaddica de esta protefna presenta dominios altamente conservados con otras protefnas de membrana externa receptoras para la hemina. A partir de los resultados obtenidos podemos concluir que se ha identificado en Sm 242 un receptor de hemina.

Autor

Battistoni Urrutia, Federico

Editor

Facultad de Química
UdelaR

Fecha

2002

Colaborador

Fabiano, Elena (Directora de Tesis)

Derechos

Información sobre Derechos de Autor

(Por favor lea este aviso antes de abrir los documentos u objetos)

La legislación uruguaya protege el derecho de autor sobre toda creación literaria, científica o artística, tanto en lo que tiene que ver con sus derechos morales, como en lo referente a los derechos patrimoniales con sujeción a lo establecido por el derecho común y las siguientes leyes (LEY 9.739 DE 17 DE DICIEMBRE DE 1937 SOBRE PROPIEDAD LITERARIA Y ARTISTICA CON LAS MODIFICACIONES INTRODUCIDAS POR LA LEY DE DERECHO DE AUTOR Y DERECHOS CONEXOS No. 17.616 DE 10 DE ENERO DE 2003, LEY 17.805 DE 26 DE AGOSTO DE 2004, LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006 LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006)

ADVERTENCIA - La consulta de este documento queda condicionada a la aceptación de las siguientes condiciones de uso: Este documento es únicamente para usos privados enmarcados en actividades de investigación y docencia. No se autoriza su reproducción con fines de lucro. Esta reserva de derechos afecta tanto los datos del documento como a sus contenidos. En la utilización o cita de partes debe indicarse el nombre de la persona autora.

Formato

Papel

Extent

73 p.

Idioma

Español

Tipo

Tesis

Identificador

TM 576.8 BAT

Cobertura

Uruguay
Fecha de agregación
September 26, 2012
Colección
Tesis de doctorado, maestría, trabajos de diploma y monografías técnicas
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
,
Citación
Battistoni Urrutia, Federico, “Captación de hierro a partir de compuestos hemínicos por la cepa sinorhizobium meliloti 242,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed November 28, 2020, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/146.
Archivos