Formación y reacciones de peroxinitrito en mitocondrias: estudios con sondas, daño oxidativo y protección por magneso porfirinas

Dublin Core

Título

Formación y reacciones de peroxinitrito en mitocondrias: estudios con sondas, daño oxidativo y protección por magneso porfirinas

Tema

BIOQUÍMICA
RADICALES LIBRES
PEROXINITRITO
MITOCONDRIAS
TESIS
TESIS DE DOCTORADO
URUGUAY

Abstract

La formación de peroxinitrito en la mitocondria está favorecida por el suministro constante de radical superóxido a partir de la cadena de transporte electrónico mitocondrial y la difusión de óxido nítrico que alcanza a este organelo. La mayor parte de este trabajo fue realizado en un modelo de partículas submitocondriales (PSM), en presencia de succinato y un dador de óxido nítrico, el NOC-­‐7, de forma tal de estudiar la formación y cuantificar al peroxinitrito formado por una multiplicidad de métodos incluyendo fluorescencia, quimioluminiscencia y análisis inmunoquímicos. Mientras que todas las sondas que fueron evaluadas revelaron niveles casi estequiométricos de peroxinitrito respecto a sus radicales precursores, el ácido cumarin borónico (un compuesto que reacciona directamente con peroxinitrito) fue el que mostró un perfil de oxidación más consistente en las PSM formando radical superóxido, en función del flujo de óxido nítrico. Un resultado interesante surgió de los estudios inmunoquímicos que verificaron la generación de radicales proteicos en PSM inducida por peroxinitrito. En otro tipo de enfoque, utilizamos un análogo hidrofóbico de tirosina (N-­‐t-­‐BOC L-­‐tirosina tert-­‐ butil éster, BTBE) pre-­‐incorporado en mitocondrias y PSM, el cual se nitra y oxida por peroxinitrito. En las PSM conteniendo BTBE y formando radical superóxido, la exposición a flujos de óxido nítrico, causó la oxidación y posterior dimerización de la sonda en conexión con procesos de lipoperoxidación. Las PSM suplementadas con sustratos respiratorios redujeron a las Mn(III)porfirinas (MnP) a Mn(II)P, a niveles de oxígeno fisiológicamente relevantes (3-­‐30 μM); a continuación, las Mn(II)P fueron capaces de reducir al peroxinitrito a nitrito y proteger las PSM de la inhibición del consumo de oxígeno por complejo I, de la formación de radicales proteicos y de la nitración de proteínas de membrana. La pre-­‐ incubación de MnP en células endoteliales en cultivo protegió de la nitración de tirosinas proteicas mediada por peroxinitrito a partir de exposición a SIN-­‐1. A través de miscroscopía confocal Raman Resonante detectamos directamente a las MnP dentro de las células, tanto en forma reducida como oxidada; el predominio observado de la forma reducida es totalmente consistente con su rol citoprotector en procesos nitroxidativos. Globalmente, los datos apoyan la formación de peroxinitrito en mitocondrias sometidas a flujos óxido nítrico y demuestran que las MnP pueden participar de un ciclo catalítico redox a nivel mitocondrial para neutralizar el daño oxidativo dependiente de peroxinitrito.

Autor

Valez Medina, Valeria

Editor

FQ

Fecha

2013

Colaborador

Dr.Radi,Rafael (Director)
Dra.Cassina, Adriana (Co-directora)

Derechos

Información sobre Derechos de Autor

(Por favor lea este aviso antes de abrir los documentos u objetos)

La legislación uruguaya protege el derecho de autor sobre toda creación literaria, científica o artística, tanto en lo que tiene que ver con sus derechos morales, como en lo referente a los derechos patrimoniales con sujeción a lo establecido por el derecho común y las siguientes leyes (LEY 9.739 DE 17 DE DICIEMBRE DE 1937 SOBRE PROPIEDAD LITERARIA Y ARTISTICA CON LAS MODIFICACIONES INTRODUCIDAS POR LA LEY DE DERECHO DE AUTOR Y DERECHOS CONEXOS No. 17.616 DE 10 DE ENERO DE 2003, LEY 17.805 DE 26 DE AGOSTO DE 2004, LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006 LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006)

ADVERTENCIA - La consulta de este documento queda condicionada a la aceptación de las siguientes condiciones de uso: Este documento es únicamente para usos privados enmarcados en actividades de investigación y docencia. No se autoriza su reproducción con fines de lucro. Esta reserva de derechos afecta tanto los datos del documento como a sus contenidos. En la utilización o cita de partes debe indicarse el nombre de la persona autora.

Formato

PDF
Papel

Extent

102 p.

Idioma

Español

Tipo

Tesis

Identificador

577.1 VAL
Fecha de agregación
December 22, 2014
Colección
Tesis de doctorado, maestría, trabajos de diploma y monografías técnicas
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
, ,
Citación
Valez Medina, Valeria, “Formación y reacciones de peroxinitrito en mitocondrias: estudios con sondas, daño oxidativo y protección por magneso porfirinas,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed October 23, 2020, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/2356.
Archivos