N-acetylaspartylglutamate acetoxymethyl triester (NAAG.AM) as a tool for loading the neuropeptides NAAG and succinimidyl-NAAG into intact cells:effect on [3H]-dopamine exocytosis.

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Título

N-acetylaspartylglutamate acetoxymethyl triester (NAAG.AM) as a tool for loading the neuropeptides NAAG and succinimidyl-NAAG into intact cells:effect on [3H]-dopamine exocytosis.

Tema

NEUROPEPTIDOS
SEÑALES NEURONALES
EXOCITOSIS
NEUROTRANSMISORES
DOPAMINA
QUIMICA FARMACEUTICA
BIBLIOGRAFIA NACIONAL QUIMICA
1996

Abstract

Although N-acetylaspartylglutamate (NAAG) is one of the neuropeptides found in highest concentrations in the mammalian central nervous system, its functional role in neuronal signaling has not been definitively established. In some neuronal populations, NAAG is concentrated in nerve terminals and thus, it may play a role in the cytoplasmic events underlying neurotransmitter exocytosis. In the present study we have validated the use of the synthetic derivative NAAG-acetoxymethyl triester (NAAG.AM) as a tool to increase the intracellular levels of the peptide and assessed the ability of NAAG to regulate [3H]-dopamine ([3H]-DA) secretion in PC12 cells. Enzymatic degradation of NAAG.AM by nonspecific brain esterases resulted in the progressive formation of NAAG and succinimidyl-NAAG (Asu-NAAG). However, only 8% of NAAG.AM was converted to NAAG. Significant amounts of NAAG (1 nmol/mg protein) were demonstrable in cultures of the neuroblastoma cell line N2A following incubation with NAAG.AM for 2 h, with the concentration of (Asu)-NAAG being at least 100-fold higher. The pheochromocytoma cell line PC12 was used to assess the influence of loaded NAAG derivatives on [3H]-DA exocytosis. Incubation with 0.1-1 mM NAAG.AM did not affect the basal efflux or total content of [3H]-DA. However, it induced a dose-dependent decrease of [3H]-DA secretion in response to 56 mM KCl depolarization reaching an inhibition of 49% with 1 mM NAAG.AM. In contrast, NAAG.AM did not affect secretion induced by the calcium ionophore A23187 (100 microM). The present study validates the use of NAAG.AM as a tool to load NAAG derivatives into intact cells and provides preliminary evidence for an intracellular role of the peptide.

Autor

Brovia, V
Costa, A
Bedo, G
Peluffo, H
Barbeito, L

Fuente

Brazilian Journal of Medical and Biological Research v. 29, no. 2, 1996. -- p. 249-258

Editor

Associação Brasileira de Divulgação Científica

Fecha

1996

Derechos

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Formato

PDF

Idioma

Inglés

Tipo

Artículo

Identificador

ISSN: 0100-879X

Document Item Type Metadata

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Fecha de agregación
October 20, 2015
Colección
Bibliografía Nacional Química
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
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Citación
Brovia, V, “N-acetylaspartylglutamate acetoxymethyl triester (NAAG.AM) as a tool for loading the neuropeptides NAAG and succinimidyl-NAAG into intact cells:effect on [3H]-dopamine exocytosis.,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed February 9, 2023, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/3491.
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