Recombinant, Fluorescent, Peptidomimetic Tracer for Immunodetection of Imidaclothiz

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Título

Recombinant, Fluorescent, Peptidomimetic Tracer for Immunodetection of Imidaclothiz

Tema

PEPTIDOS
INMUNOLOGIA
ANTIGENOS
CROMATOGRAFIA LIQUIDA DE ALTA PRESION
ANTICUERPOS MONOCLONALES
BIBLIOGRAFIA NACIONAL QUIMICA
2018

Abstract

Peptidomimetic and anti-immunocomplex peptides, which can be readily isolated from a phage-display library, have shown great potential for small-molecule immunoassay development because they typically improve the sensitivity and avoid the use of chemical haptens as coatings or tracer antigens. However, phage-borne peptides are unconventional immunoassay reagents, which greatly limits their use in commercial applications, and require secondary reagents for detection. In order to overcome these limitations, we used C2-15, a peptidomimetic of imidaclothiz, as a model peptide fused to emerald-green fluorescent protein (EmGFP) at the N-terminus (C2-15-EmGFP) and C-terminus (EmGFP-C2-15) to generate novel fluorescent-peptide tracers. Both recombinant fluorophores reacted with similar affinity to the anti-imidaclothiz monoclonal antibody 1E7, but because of its higher expression, C2-15-EmGFP was chosen to develop a competitive magnetic-separation fluorescence immunoassay (MSFIA). After a competitive step with the analyte, the C2-15-EmGFP–antibody complex bound to the magnetic beads was separated with a magnet, and because of the fast dissociation of the peptide–antibody interaction, the fluorescence signal was detected following the spontaneous dissociation of the complex in fresh buffer. The concentration of imidaclothiz causing the 50% inhibitory concentration (IC50) was 11.00 ng mL–1, and the MSFIA performed with excellent recovery and had a good correlation with high-performance liquid chromatography in different matrices.

Autor

Ding, Y.
Hua, X.
Du, M.
Yang, Q.
Hou, L.
Wang, L.
Wang, L.
Liu, F.
Wang, M.

Fuente

Analytical Chemistry v. 90, no 23, 2018. -- p. 13996-14002

Editor

American Chemical Society

Fecha

2018

Derechos

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Formato

PDF

Idioma

Inglés

Tipo

Artículo

Identificador

DOI: 10.1021/acs.analchem.8b03685

Document Item Type Metadata

Original Format

PDF
Fecha de agregación
April 3, 2019
Colección
Bibliografía Nacional Química
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
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Citación
Ding, Y., “Recombinant, Fluorescent, Peptidomimetic Tracer for Immunodetection of Imidaclothiz,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed July 20, 2019, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/5688.
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