N-Óxido de heterociclos aromáticos con actividad sobre Trypanosoma Cruzi:Aproximación al tipo de muerte celular y mecanísmo de acción

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Título

N-Óxido de heterociclos aromáticos con actividad sobre Trypanosoma Cruzi:Aproximación al tipo de muerte celular y mecanísmo de acción

Tema

QUÍMICA ORGÁNICA
QUÍMICA MÉDICA
ANTICHAGÁSICOS
TRYPANOSOMA CRUZI
N-ÓXIDO
TESIS
TESIS DE MAESTRIA
URUGUAY

Abstract

La enfermedad de Chagas o Tripanosomiasis Americana es una zoonosis cuyo agente etiológico es un protozoario flagelado, el Trypanosoma cruzi (T. cruzi) (orden Kinetoplastida, familia Trypanosomatidae). A más de un siglo de su descubrimiento, esta patología compromete la salud de un gran número de habitantes en Latinoamérica, no existiendo hasta el momento fármacos completamente efectivos para su tratamiento. De la quimioteca de agentes anti-T. cruzi de nuestro laboratorio se seleccionaron compuestos pertenecientes a tres diferentes familias de N-óxido de heterociclo-aromático (tres furoxanos, Fx1, Fx2 y Fx3, dos benzofuroxanos, Bfx1 y Bfx2, y dos di-N-óxido de quinoxalinas, Qdo1, Qdo2), además de un nitrofurano (Nf1). Estos productos, son el resultado de optimizaciones químicas dirigidas por la actividad observada. Se escoge además como fármaco de referencia a Nifurtimox, como forma de comparar el comportamiento biológico de T. cruzi frente a los compuestos objeto de este estudio. Trabajando sobre epimastigotes de T. cruzi se realizaron estudios que demostraron o aproximaron al tipo de muerte celular que el parásito expuesto a cada uno de los compuestos estudiados. Primariamente fueron realizados estudios de microscopia óptica-tinción con azul de tripan o microscopía fluorescente-tinción con ioduro de propidio. De estos estudios, se determinó que todos los compuestos a dosis altas, excepto el furoxano Fx1 que por su baja actividad y baja solubilidad no permite extraer conclusiones, promueven una pérdida de la integridad de membrana de T. cruzi que indicarían una muerte por necrosis. Los estudios de muerte celular a bajas dosis, por ensayo de TUNEL, no evidencian muerte de T. cruzi por apoptosis con ninguno de los compuestos estudiados. Particularmente, el nitrofurano Nf1, el furoxano Fx3 y el benzofuroxano Bfx1 inducen en el parásito, previo a su muerte y manteniendo adecuada movilidad, la formación de estructuras citoplasmáticas vacuolares que podrían indicar muerte por autofagia. Para concluir respecto a este punto se realizaron estudios morfológicos por microscopia electrónica de transmisión y experimentos con el inhibidor de autofagia 3-Metiladenina. Estos estudios no son concluyentes, sin embargo las microfotografías del tratamiento con estos 3 compuestos identifican estructuras tipo-autofagosoma. Se implementa el uso de 1H-RMN para determinar el tipo de muerte celular en epimastigotes de T. cruzi de la cepa Y cuantificando las señales correspondientes a metilenos y metilos de los lípidos móviles de las membranas, estudiando además las modificaciones de fosfatidilcolina. Esta es la primera vez que se utiliza dicha técnica para estudios con parásitos y especialmente con T. cruzi. Por otro lado, se estudió el cambio en el perfil metabólico de epimastigotes de T. cruzi tratados con los compuestos de este estudio. Para ello se utilizó la medida, por 1H-RMN, de los metabolitos excretados por el parásito. De acuerdo a estos resultados se decidió identificar un grupo de enzimas que podrían estar involucradas en el mecanismo de acción de los agentes. Por ello, se analizó la inhibición de deshidrogenasas mitocondriales, por ensayo con MTT a tiempos cortos. Estos estudios permiten plantear un posible mecanismo de acción común para los di-N-óxido de quinoxalinas Qdo1 y Qdo2 por inhibición de la fumarato reductasa o la malato deshidrogenasa mitocondriales o ambas.

Autor

Benítez, Diego

Editor

Facultad de Química
UdelaR

Fecha

2011

Colaborador

Dra. Gonzalez, Mercedes ( Directora de tesis)
Dr. Cerecetto,Hugo (Director de tesis)

Derechos

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Formato

Papel
Pdf

Extent

72 p.

Idioma

Español

Tipo

Tesis

Identificador

TD 615.2/3: 547 BEN

Cobertura

Uruguay

Document Item Type Metadata

Original Format

PDF
Fecha de agregación
August 13, 2012
Colección
Tesis de doctorado, maestría, trabajos de diploma y monografías técnicas
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
, ,
Citación
Benítez, Diego, “N-Óxido de heterociclos aromáticos con actividad sobre Trypanosoma Cruzi:Aproximación al tipo de muerte celular y mecanísmo de acción,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed May 19, 2019, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/76.
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