Estudio del rol fisiológico de las aglutininas frías naturales humanas IgM anti-I en la eliminación de eritrocitos envejecidos
Dublin Core
Título
Estudio del rol fisiológico de las aglutininas frías naturales humanas IgM anti-I en la eliminación de eritrocitos envejecidos
Tema
INMUNOLOGIA
ANTICUERPOS
AUTOANTICUERPOS
AUTOANTICUERPOS NATURALES
TESIS DE MAESTRÍA
Abstract
En el suero de humanos y murinos sanos se detectan anticuerpos contra antigenos propios, llamados autoanticuerpos naturales (revisado por Avrameas, 1991). En particular, en humanos se distinguen las aglutininas frias que reconocen el antigeno eritrocitario I (Wiener y co!., 1956). Se ha propuesto que las aglutininas frias naturales podrian participar en la eliminaci6n de eritrocitos envejecidos (Gofii y co!., 1990). Esta idea se apoya en el hecho de que el tratamiento de eritrocitos in vitro con proteasas aumenta la reactividad de las aglutininas frias, por 10 cual pod ria tratarse de antigeno previamente inaccesible. Se sugiere que in vivo podria ocurrir algun mecanismo semejante que permitiera exponer mayor concentraci6n de antigeno I en eritrocitos envejecidos.
En este trabajo se estudi6 si las aglutininas frias reaccionan en forma diferencial frente a los eritrocitos con distinto grado de envejecimiento.
Para ello en primer lugar se separaron eritrocitos de diferente grado de envejecimiento, utilizando gradientes de densidad, ya que esta descrito que existe correlaci6n entre densidad y edad. El grado de envejecimiento de las distintas fracciones se evalu6 de acuerdo a algunos marcadores de edad anteriormente descritos (Branch y co!., 1983). Con un nivel de significaci6n del 5 % se encontraron diferencias significativas, tanto en el porcentaje de reticulocitos como en el porcentaje de hemoglobina glicosilada, entre las poblaciones de edades extremas y la media de los eritrocitos.
En segundo lugar, se estudi6 la interacci6n entre las aglutininas frias y los eritrocitos de edades extremas. Para ello se optimiz6 un ensayo de alta sensibilidad que permiti6 determinar el numero de sitios de antigeno I por eritrocito. Esto requiri6 en primer lugar purificar la aglutinina fria y en segundo lugar marcarla con 1251. Los resultados sugieren que la incorporaci6n de iodo en residuos de tirosina, ligadas al sitio activo, afect6 su actividad bio16gica en tanto que en residuos de lisina permaneci6 inalterada.
En terminos generales se encontr6 que el numero de sitios de antigeno I por eritrocito en adultos normales fue de (27.000 ± 9.000) en tanto que con eritrocitos tratados con papain a fue de (80.000 ± 20.000), siendo en cada individuo el numero de sitios de antigeno I en eritrocitos sin tratar entre un medio y un tercio de los expuestos luego del tratamiento. Esto ultimo es consistente con la idea de que la reactividad de las aglutininas frias con los eritrocitos tratados con papaina se debe a un aumento en el numero de sitios expuestos.
La reproducibilidad del ensayo fue baja, 10 cual no permiti6 discriminar si se producen pequefias variaciones en la exposici6n del antigeno I en las fracciones de eritrocitos de diferente grado de envejecimiento que pudiesen tener un rol in vivo. Se estudi61a incidencia de algunas fuentes de error del ensayo con el objetivo de optimizarlo.
En este trabajo se estudi6 si las aglutininas frias reaccionan en forma diferencial frente a los eritrocitos con distinto grado de envejecimiento.
Para ello en primer lugar se separaron eritrocitos de diferente grado de envejecimiento, utilizando gradientes de densidad, ya que esta descrito que existe correlaci6n entre densidad y edad. El grado de envejecimiento de las distintas fracciones se evalu6 de acuerdo a algunos marcadores de edad anteriormente descritos (Branch y co!., 1983). Con un nivel de significaci6n del 5 % se encontraron diferencias significativas, tanto en el porcentaje de reticulocitos como en el porcentaje de hemoglobina glicosilada, entre las poblaciones de edades extremas y la media de los eritrocitos.
En segundo lugar, se estudi6 la interacci6n entre las aglutininas frias y los eritrocitos de edades extremas. Para ello se optimiz6 un ensayo de alta sensibilidad que permiti6 determinar el numero de sitios de antigeno I por eritrocito. Esto requiri6 en primer lugar purificar la aglutinina fria y en segundo lugar marcarla con 1251. Los resultados sugieren que la incorporaci6n de iodo en residuos de tirosina, ligadas al sitio activo, afect6 su actividad bio16gica en tanto que en residuos de lisina permaneci6 inalterada.
En terminos generales se encontr6 que el numero de sitios de antigeno I por eritrocito en adultos normales fue de (27.000 ± 9.000) en tanto que con eritrocitos tratados con papain a fue de (80.000 ± 20.000), siendo en cada individuo el numero de sitios de antigeno I en eritrocitos sin tratar entre un medio y un tercio de los expuestos luego del tratamiento. Esto ultimo es consistente con la idea de que la reactividad de las aglutininas frias con los eritrocitos tratados con papaina se debe a un aumento en el numero de sitios expuestos.
La reproducibilidad del ensayo fue baja, 10 cual no permiti6 discriminar si se producen pequefias variaciones en la exposici6n del antigeno I en las fracciones de eritrocitos de diferente grado de envejecimiento que pudiesen tener un rol in vivo. Se estudi61a incidencia de algunas fuentes de error del ensayo con el objetivo de optimizarlo.
Autor
Vigorito, Elena
Editor
Facultad de Química
UdelaR
Fecha
1994
Colaborador
Goñi, Fernando(Director de tesis)
Derechos
Información sobre Derechos de Autor
(Por favor lea este aviso antes de abrir los documentos u objetos)
La legislación uruguaya protege el derecho de autor sobre toda creación literaria, científica o artística, tanto en lo que tiene que ver con sus derechos morales, como en lo referente a los derechos patrimoniales con sujeción a lo establecido por el derecho común y las siguientes leyes (LEY 9.739 DE 17 DE DICIEMBRE DE 1937 SOBRE PROPIEDAD LITERARIA Y ARTISTICA CON LAS MODIFICACIONES INTRODUCIDAS POR LA LEY DE DERECHO DE AUTOR Y DERECHOS CONEXOS No. 17.616 DE 10 DE ENERO DE 2003, LEY 17.805 DE 26 DE AGOSTO DE 2004, LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006 LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006)
ADVERTENCIA - La consulta de este documento queda condicionada a la aceptación de las siguientes condiciones de uso: Este documento es únicamente para usos privados enmarcados en actividades de investigación y docencia. No se autoriza su reproducción con fines de lucro. Esta reserva de derechos afecta tanto los datos del documento como a sus contenidos. En la utilización o cita de partes debe indicarse el nombre de la persona autora.
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Formato
Papel
Extent
239 p.
Idioma
Español
Tipo
Tesis
Identificador
TM 612.017 VIG
Cobertura
Uruguay