An efficient method for variable region assembly in the construction of scFv phage display libraries using independent strand amplification

Dublin Core

Título

An efficient method for variable region assembly in the construction of scFv phage display libraries using independent strand amplification

Tema

ANTICUERPOS MONOCLONALES HUMANOS
INMUNOGLOBULINAS
BIBLIOGRAFIA NACIONAL QUIMICA
2012

Abstract

Phage display library technology is a common method to produce human antibodies. In this technique, the immunoglobulin variable regions are displayed in a bacteriophage in a way that each filamentous virus displays the product of a single antibody gene on its surface. From the collection of different phages, it is possible to isolate the virus
that recognizes specific targets. The most common form in which to display antibody variable regions in the phage is the single chain variable fragment format (scFv), which requires assembly of the heavy and light immunoglobulin variable
regions in a single gene.
In this work, we describe a simple and efficient method for the assembly of immunoglobulin heavy and light chain variable regions in a scFv format. This procedure involves a two-step reaction: (1) DNA amplification to produce the single
strand form of the heavy or light chain gene required for the fusion; and (2) mixture of both single strand products followed by an assembly reaction to construct a complete scFv gene. Using this method, we produced 6-fold more scFv
encoding DNA than the commonly used splicing by overlap extension PCR (SOE -PCR) approach. The scFv gene produced by this method also proved to be efficient in generating a diverse scFv phage display library. From this scFv library, we
obtained phages that bound several non-related antigens, including recombinant proteins and rotavirus particles

Autor

Sotelo, Pablo H
Collazo, Norberto
Zuñiga, Roberto
Gutiérrez González, Matías
Hager Ribeiro, Carolina
Aguillón, Juan Carlos
Molina, María Carmen

Fuente

Monoclonal Antibodies v. 4, no. 4, 2012.-- p. 542-550

Editor

Landes Bioscience

Fecha

2012

Derechos

Información sobre Derechos de Autor

(Por favor lea este aviso antes de abrir los documentos u objetos)

La legislación uruguaya protege el derecho de autor sobre toda creación literaria, científica o artística, tanto en lo que tiene que ver con sus derechos morales, como en lo referente a los derechos patrimoniales con sujeción a lo establecido por el derecho común y las siguientes leyes

(LEY 9.739 DE 17 DE DICIEMBRE DE 1937 SOBRE PROPIEDAD LITERARIA Y ARTISTICA CON LAS MODIFICACIONES INTRODUCIDAS POR LA LEY DE DERECHO DE AUTOR Y DERECHOS CONEXOS No. 17.616 DE 10 DE ENERO DE 2003, LEY 17.805 DE 26 DE AGOSTO DE 2004, LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006 LEY 18.046 DE 24 DE OCTUBRE DE 2006)

ADVERTENCIA - La consulta de este documento queda condicionada a la aceptación de las siguientes condiciones de uso: Este documento es únicamente para usos privados enmarcados en actividades de investigación y docencia. No se autoriza su reproducción con fines de lucro. Esta reserva de derechos afecta tanto los datos del documento como a sus contenidos. En la utilización o cita de partes debe indicarse el nombre de la persona autora.



 

Idioma

Inglés

Tipo

Artículo

Identificador

http://dx.doi.org/10.4161/mabs.20653

Document Item Type Metadata

Original Format

PDF
Fecha de agregación
September 3, 2012
Colección
Bibliografía Nacional Química
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
,
Citación
Sotelo, Pablo H, “An efficient method for variable region assembly in the construction of scFv phage display libraries using independent strand amplification,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed December 2, 2020, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/116.
Archivos