An antibody-based affinity chromatography tool to assess Cu, Zn superoxide dismutase (SOD) G93A structural complexity in vivo.

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Título

An antibody-based affinity chromatography tool to assess Cu, Zn superoxide dismutase (SOD) G93A structural complexity in vivo.

Tema

ANTICUERPOS
ANIMALES
CROMATOGRAFIA DE AFINIDAD
BIBLIOGRAFIA NACIONAL QUIMICA
PROCESAMIENTO DE PROTEINAS
ESCLEROSIS LATERAL AMIOTROFICA
ENFERMEDADES CONFORMACIONALES
2010

Abstract

Conformational diseases are a group of diverse disorders that have been associated with misfolding of specific proteins, leading to their aggregation in particular cell tissues. Despite their relevance, the mechanisms involved in neurodegenerative processes remains poorly understood. Mutations in Cu,Zn superoxide dismutase (SOD1) are implicated in death of motor neurons in amyotrophic lateral sclerosis. Among others, the SOD1G93A mutation is known to weaken the structure and this could lead to conformational variations of the protein. As an approach to understand the tissue-specific propensity of protein aggregation, we developed an experimental procedure allowing rapid extraction of variants of human SOD1 (hSOD1) produced in different tissues. Using an antibody-based affinity chromatography procedure enzymatically active hSOD was extracted, indicating preservation of its native conformation. Analysis of the eluted fractions of hSOD extracted from the brain and liver of transgenic hSODG93A rats provided evidence about heterodimers rSOD–hSODG93A formation in both extracts. Moreover, when characterized by 2-DE and MALDI-TOF/TOF MS, the extracted hSODG93A showed a complex profile suggesting the existence of various covalent modifications of the enzyme in both tissues. Thus, this method should allow following post-translational modifications of hSOD1 produced in various tissues.

Autor

Palacios, Florencia
Cota Basso, Germán Luis
Horjales, Sofía
Lima, Analía
Battistoni Spinelli, Julio José
Sotelo Silveira, José Roberto
Marín, Mónica

Fuente

Biotechnology Journal v. 5, no. 3, 2010. -- p. 328-334

Editor

Wiley

Fecha

2010

Derechos

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Formato

PDF

Idioma

Inglés

Tipo

Artículo

Identificador

DOI 10.1002/biot.200900106

Document Item Type Metadata

Original Format

PDF
Fecha de agregación
December 16, 2014
Colección
Bibliografía Nacional Química
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
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Citación
Palacios, Florencia, “An antibody-based affinity chromatography tool to assess Cu, Zn superoxide dismutase (SOD) G93A structural complexity in vivo.,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed September 18, 2020, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/2319.
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