Composición lipídica de microalgas autóctonas del Uruguay e influencia de las condiciones de cultivo

TESIS

TESIS DE MAGISTER

ALGAS

METODOS ANALITICOS

URUGUAY

BOTANICA

LIPIDOS

ACIDOS GRASOS

El objetivo general de este trabajo fue la identificacion de algunas especies de rnicroalgas dulceacuicolas 0 subaereas existentes en nuestro pais, el estudio de su composicion lipidica y su dependencia cuali-cuantitativa de las condiciones de cultivo experimentales Su cumplimiento implico desarrollar metodos, procesos y tecnicas que permitieron determinar las condiciones optimas de cultivos, segitn los fines perseguidos, para algunas de las eventuales aplicaciones de las microalgas encontradas en nuestro pais, asi como poner a punta las tecnicas bioquimicas de analisis requeridas. Los objetivos especijicos fueron: 1) Colectar, purificar, aislar e identificar especies de microalgas de agua dulce del Uruguay. 2) Realizar cultivos de mantenimiento unialgal de las especies identificadas. 3) Poner a punta de ensayos analfticos para la determinacion cuali-cuantitativa de los lipid os algales 4) Determinar la combinacion optima de panlmetros fisicos y quimicos que permitieron la obtencion de una mayor biomasa en el menor tiempo posible, con una riqueza relativamente mayor en acid os grasos poliinsaturados (PUFAs). Se intento poner en marcha un area y una metodologia de trabajo nuevos para el pais, con amplias posibilidades de desarrollo y aplicacion y con un costa relativamente bajo en infraestructura. En este trabajo se cultivaron microalgas de diferentes Familias, colectadas en el pais, bajo distintas condiciones de temperatura, luz y nutrientes Para esto se dedico una primera etapa a optimizar los muestreos, aislamiento de las cepas colectadas y su mantenimiento en el laboratorio. Se estudiaron tres Chlorophyceae (Chlorella vulgaris, Oocystis sp. y Scenedesmus quadricauda), y dos Cyanophyceae (Chroococcus minutus y Chroocopcidiopsis sp.). En algunos casos se logro identificar la especie y en otros se llego solamente al Genero. Para ilustrar mejor los resultados obtenidos, las microalgas se agrupan por Clase. La Chlorella vulgaris se obtuvo de una pileta de oxidacion de aguas industriales; se purifico y cultivo en medio ISO 8692, luz continua, 28°C y aireacion. Se construyo la curva de crecimiento y se determino la composicion en acid os grasos de las muestras colectadas en las J jases de latencia, exponencial y de muerte. A partir de ello se determino que la colecta mas • conveniente resulta a los 15 dias de inoculado el cultivo, cuando aun este se encuentra en lase exponencial. _ Se realizaron modificaciones en la condiciones de cultivo: se trabajo con jotoperiodo de 16: 8 y se cambio la relacion C!!I y la fuente de nitrogeno. Se obtuvo un mayor porcentaje de PUFAs parajotoperiodos 16: 8 y 17 mg/l de urea como fuente de nitrogeno en el medio ISO 8692. Tambien se trabajo a 200C y luz natural, pero no se obtuvo resultados positivos. La Oocystis sp y la Scenedesmus quadricauda se obtuvieron de una fuente ornamental de jardin, mezcladas con otras microalgas. La Oocystis sp. se aislo y cultivo en jorma similar a la Chlorella vulgaris. Con la Scenedesmus quadricauda no se obtuvieron buenos resultados en el aislamiento, por 10 que no pudo completar su estudio. En los cultivos de Oocystis sp. se obtuvo el mayor porcentaje en PUFAs, en el medio ISO 8692 con aporte de nitrogeno de 17 mg/l de urea, tanto a 280C y jotoperiodos 16: 8 como a 20°C y luz natural. De las dos Cyanophyceae estudiadas, el Chroococcus minutus se obtuvo del raspado de la corleza de un arbol y la Chroocopcidiosis sp. de una pared Ambas se cultivaron en medios CgIO y SOT diluido al cuarto, tanto a 280C y jotoperiodos 16: 8 como a 20°C y luz natural. En ambas el mayor porcentaje de PUFAs se logr6 con medio SOT/4, a 20°c y luz natural. Para poder evaluar mejor los resultados obtenidos en todos los cultivos, se defini6 un parinnetro que relaciona La cantidad de biomasa en el momenta de fa colecta (15 dins de cultivo), Sit porcentaje de lipidos y el porcentaje en PUFAs en ello. A este panimetro se Ie llam6 Productividad en PUFAs. Se observo que la mayor Productividad es para el Chroococcus minutus cultivado con medio SOT/4 a 20°C y luz natural. Como resumen general de este trabajo se puede indicar que se logr6 adaptar al cultivo in vitro a cuatro especies de microaLgas de agua dulce colectadas en el Uruguay. Su estudio estuvo orientado al contenido en lipidos y su composici6n en acid os grasos,. en vista de su posible uso como fuente natural de los mismos. La aplicaci6n de variaciones en las condiciones de cultivo permitieron modificar La composici6n en acid os grasos de las cepas estudiadas. Como corolario se puede decir que, a partir de esta tesis, se cuenta con la capacitaci6n y el dominio de los metados de cultivo y de anillisis de microalgas que permitiran proseguir estudios futuros, no s610 continuando el relevamiento propuesto sino utilizando cepas de colecci6n y realizando trabajos con otros grupos latinoamericanos, tanto con algas de agua dulce como marinas.

Montevideo : UdelaR-Facultad de Química

1993

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TM 582.26 PAG