Immobilized peptide-N-glycosidase F onto magnetic nanoparticles: a biotechnological tool for protein

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Título

Immobilized peptide-N-glycosidase F onto magnetic nanoparticles: a biotechnological tool for protein

Tema

GLICANOS
DESGLICOSILACION
ANALISIS GLICOMICO
INMOVILIZACION ENZIMATICA
NANOPARTICULAS
PEPTIDOS
GLUCOSIDASA
BIBLIOGRAFIA NACIONAL QUIMICA
2022

Abstract

The elucidation of glycans biological function is essential to
understand their role in biological processes, both normal and
pathological. Immobilized glycoenzymes are excellent tools
for this purpose as they can selectively release glycans from
glycoproteins without altering their backbone. They can be
easily removed from the reaction mixture avoiding their
interference in subsequent experiments. Here, we describe the
immobilization of peptide-N-glycosidase F (PNGase F) onto
silica magnetic nanoparticles with immobilization yields of
86% and activity yields of 12%. Immobilized PNGase F showed
higher thermal stability than its soluble counterpart, and could
be reused for at least seven deglycosylation cycles. It was
efficient in the deglycosylation of several glycoproteins
(ribonuclease B, bovine fetuin, and ovalbumin) and a protein
lysate from the parasite Fasciola hepatica under native
conditions, with similar performance to that of the soluble
enzyme. Successful deglycosylation was evidenced by a
decrease in specific lectin recognition of the glycoproteins
(40%–80%). Moreover, deglycosylated F. hepatica lysate
allowed us to confirm the role of parasite N-glycans in the
inhibition of the lipopolysaccharide-induced maturation of
dendritic cells. Immobilized PNGase F probed to be a robust
biotechnological tool for deglycosylation of glycoproteins and
complex biological samples under native conditions.

Autor

Bidondo, Lucía
Festari, Florencia
Freire, Teresa

Fuente

Biotechnology and Applied Biochemistry, v. 69, n° 1, 2022. -- pp. 209-220.

Editor

Wiley

Fecha

2022

Derechos

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Formato

PDF

Idioma

Inglés

Tipo

Artículo

Identificador

10.1002/bab.2099

Document Item Type Metadata

Original Format

PDF
Fecha de agregación
April 5, 2022
Colección
Bibliografía Nacional Química
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
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Citación
Bidondo, Lucía, “Immobilized peptide-N-glycosidase F onto magnetic nanoparticles: a biotechnological tool for protein,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed June 27, 2022, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/6476.
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