“Ready-to-use” immunosensor for the detection of small molecules with fast readout

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Título

“Ready-to-use” immunosensor for the detection of small molecules with fast readout

Tema

BIOSENSORES
PEPTIDOMIMETICO
LUCIFERASA
INMUNOENSAYOS
NANOTECNOLOGIA
BIBLIOGRAFIA NACIONAL QUIMICA
2022

Abstract

Immunoassays are commonly used methods for detection of small molecules that typically require numerous steps of the labeling between immune-recognition reagents and tracers, immobilization and recurrent washing, making them time consuming and difficult to adapt into point of care formats. Here we describe a “ready-to-use” homogeneous competitive immunosensor with an assay time of 10 min that is based exclusively on recombinant reagents. The signal is produced when the split fragments of the nano luciferase (Nluc) are brought together by the interaction of a heavy chain only variable domain (VHH) with a peptidomimetic of the target small molecule. A VHH to 2,4-dichlorophenoxyacetic acid (2,4-D) was used to isolated the peptidomimetic (NGFFEPWQVVYV)
from phage display libraries using six panning conditions. Then the peptidomimetic and VHH were fused with the larger (LgN) and smaller piece (SmN) of split fragments of Nluc, respectively. In order to optimize the signal and sensitivity of the immunosensor, we explored the effects of the spacer between the peptidomimetic and LgN, the copy number of peptidomimetics, and the spacer between SmN and VHH, generating 24 combinations that allowed to conclude on their respective roles. Eventually, the developed “ready-to-use” immunosensor performed excellent signal-to-noise ratio and sensitivity, and could be applied to the detection of 2,4-D in real samples. Meanwhile, the immunosensor totally realizes labeling-free, immobilization-free and washing-free, also can be
produced in a highly cost effective way.

Autor

Ding, Yuan
Cui, Panpan
Chen, He
Li, Jiao
Huang, Lianrun
Hammock, Bruce D.
Wang, Minghua
Hua, Xiude

Fuente

Biosensors and Bioelectronics v. 201, 2022. -- e113968

Editor

Elsevier

Fecha

2022

Derechos

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Formato

PDF

Idioma

Inglés

Tipo

Artículo

Identificador

10.1016/j.bios.2022.113968

Document Item Type Metadata

Original Format

PDF
Fecha de agregación
April 6, 2022
Colección
Bibliografía Nacional Química
Tipo de Elemento
Document
Etiquetas
, , , ,
Citación
Ding, Yuan, ““Ready-to-use” immunosensor for the detection of small molecules with fast readout,” RIQUIM - Repositorio Institucional de la Facultad de Química - UdelaR, accessed August 11, 2022, http://riquim.fq.edu.uy/items/show/6478.
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